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项目简介
技术简介:
专利类型: 发明 专利申请号: CN201910628110.5 公开号: CN110305908A
专利权人: 南方医科大学 发明设计人: 荣知立;林瑛;马淑凤;王新龙;吕杰;刘成芳
所属领域:
摘要: 本发明公开了一种高效精准靶向的基因整合系统及其应用,系统包括表达外源性融合蛋白系统、向导RNA和供体载体;表达外源性融合蛋白系统包括Cas9或SB或Cas9与SB、N123、N57、SB100XE279D其中之一组成的融合蛋白;向导RNA为靶向基因组区域和供体载体两端的20bp的长序列;供体载体两端有向导RNA靶向位点、SB结合位点和中间的目的基因整合片段。本发明可同时实现基因的靶向、切割和整合;本发明利用SB转座酶结合转座子供体形成四聚体,可使供体载体定向到靶位点,更有利于基因的靶向整合;本发明利用体内线性化元件,可使供体载体体内线性化,更有利于基因的整合;本发明实现基因敲入的方法是基于SB转座酶和基因修复机制中的NHEJ,这将使本发明更加高效的实现基因的整合。
补充信息
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市场前景:
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